ʻO ka PCR, a i ʻole polymerase chain reaction, kahi ʻenehana i hoʻohana ʻia e hoʻonui i nā kaʻina DNA.Ua hoʻokumu mua ʻia i ka makahiki 1980 e Kary Mullis, ka mea i loaʻa i ka makana no ka Nobel ma ke kemika ma 1993 no kāna hana.Ua hoʻololi ʻo PCR i ka biology molecular, hiki i nā mea noiʻi ke hoʻonui i ka DNA mai nā mea liʻiliʻi liʻiliʻi a noiʻi iā ia i nā kikoʻī.
ʻO ka PCR kahi kaʻina hana ʻekolu i hana ʻia i loko o kahi kaʻa kaʻa wela, kahi mīkini hiki ke hoʻololi wikiwiki i ka mahana o kahi hui ʻana.ʻO nā ʻanuʻu ʻekolu he denaturation, annealing, a me ka hoʻonui.
Ma ka hana mua, denaturation, ua wela ka DNA stranded pālua i kahi wela kiʻekiʻe (maʻamau ma kahi o 95 ° C) e wāwahi i nā kaula hydrogen e paʻa ai nā kaula ʻelua.Loaʻa kēia i ʻelua mau molekele DNA i hoʻopaʻa ʻia.
Ma ka ʻanuʻu ʻelua, hoʻohui ʻia, hoʻohaʻahaʻa ʻia ka mahana ma kahi o 55 ° C e ʻae i nā kumu mua e hoʻopili i nā kaʻina hoʻohui ma ka DNA stranded hoʻokahi.ʻO nā kumu mua he mau ʻāpana pōkole o ka DNA i hoʻolālā ʻia e hoʻohālikelike i nā kaʻina o ka hoihoi i ka DNA target.
I ke kolu o ka hoʻonui ʻana, hoʻonui ʻia ka mahana a puni 72°C e ʻae i ka Taq polymerase (kahi ʻano DNA polymerase) e synthesize i kahi kaula hou o DNA mai nā kumu mua.Loaʻa ka Taq polymerase mai kahi hua bacteria e noho ana i nā pūnāwai wela a hiki iā ia ke pale i nā wela kiʻekiʻe i hoʻohana ʻia ma PCR.
Ma hope o hoʻokahi pōʻaiapuni o PCR, ʻelua kope ka hopena o ke kaʻina DNA target.Ma ka hana hou ʻana i nā ʻanuʻu ʻekolu no kekahi mau pōʻaiapuni (maʻamau 30-40), hiki ke hoʻonui nui ʻia ka helu o nā kope o ke kaʻina DNA target.ʻO ia hoʻi, hiki ke hoʻonui ʻia kahi helu liʻiliʻi o ka DNA hoʻomaka e hana i nā miliona a i ʻole nā piliona kope.
He nui nā noi PCR i ka noiʻi a me nā diagnostics.Hoʻohana ʻia ia i ka genetics e aʻo i ka hana o nā genes a me nā mutations, i nā forensics e kālailai i nā hōʻike DNA, i ka maʻi maʻi infectious e ʻike ai i ka hele ʻana o nā pathogens, a ma ka prenatal diagnostic e nānā i nā maʻi genetic i nā fetuses.
Ua hoʻololi ʻia ka PCR no ka hoʻohana ʻana i nā ʻano like ʻole, e like me ka quantitative PCR (qPCR), e hiki ai ke ana i ka nui o ka DNA a hoʻohuli i ka transcription PCR (RT-PCR), hiki ke hoʻohana ʻia e hoʻonui i nā kaʻina RNA.
ʻOiai ka nui o kāna mau noi, he mau palena ka PCR.Pono ia i ka ʻike o ke kaʻina pahuhopu a me ka hoʻolālā ʻana o nā primers kūpono, a hiki ke kuhi hewa inā ʻaʻole i hoʻopaʻa pono ʻia nā kūlana pane.Eia nō naʻe, me ka hoʻolālā hoʻokolohua akahele a me ka hoʻokō ʻana, noho mau ʻo PCR i kekahi o nā mea hana ikaika loa i ka biology molecular.
Ka manawa hoʻouna: Feb-22-2023